一 细胞增殖检测的意义

细胞增殖是生物体的重要生命特征，是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础。监测细胞群的生长对细胞的状态研究很有必要。科研工作者们经常需要检测细胞增殖情况，比如验证抗肿瘤药物的药效时，监测细胞增殖及存活情况；研究肿瘤侵袭与转移模型时，分析细胞转移或侵袭的路径；分析创伤的修复或组织的重建时，检测细胞生长情况等等。检测细胞增殖及活性变化则可以很好的反映细胞的生长状况。

 

二 细胞增殖的研究方法

细胞增殖的研究方法有很多种，根据检测原理不同，主要分为DNA合成检测法、代谢活性检测法、细胞增殖标志物检测法等。本文重点介绍DNA合成检测之Brdu检测法，传统DNA合成检测方法使用胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）掺入DNA，然后通过放射自显影或闪烁计数对DNA进行定量，该方法由于存在放射性物质、实验周期长、操作繁琐，且需要昂贵的设备，目前已被BrdU（5-Bromo-2-deoxyuridine，5-溴脱氧尿嘧啶核苷）检测方法取代，BrdU作为一种胸苷类似物，可选择性地掺入增殖细胞的DNA中，而且可稳定存在，并带到子代细胞中，细胞经过固定和变性处理后，可用免疫学方法检测DNA中BrdU的含量，从而判断细胞的增殖能力。

BrdU分子结构

 

小编整理汇总了常见细胞增殖检测方法，详见下表。

 

细胞增殖检测方法汇总

方法分类	检测方法	检测原理
DNA合成检测	Brdu检测法	BrdU是胸腺嘧啶核苷的类似物，能够在细胞增殖时期代替胸苷掺入增殖细胞的DNA中，而后利用免疫学方法检测DNA中BrdU的含量，从而判断细胞增殖能力
DNA合成检测	胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）渗入法	用同位素3H标记TdR作为DNA合成前体掺入DNA合成代谢过程，通过测定放射性强度，反应细胞DNA代谢及增殖情况
代谢活性检测	MTT比色法	在活细胞生长和增殖过程中，线粒体内的脱氢酶可将黄色的MTT分解成蓝紫色的Formazan结晶，再利用酶标仪测定，以反映出活细胞数目，间接反应细胞增殖情况
细胞增殖标志物检测	Ki67,PCNA,MCM-2等相关抗原检测	通过观察增殖细胞中表达但非增殖细胞中不存在的特定蛋白质，来反映细增殖情况
荧光染料检测	羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE）检测法	CFSE是一种荧光染料，脂溶性高，进入细胞，可以与胞内氨基酸发生不可逆的结合，在细胞的分裂过程中能进入子代细胞，同时荧光强度减半，再用流式细胞仪或荧光显微镜进行分析
实时动态电极阻抗检测	RTCA实时无标记细胞分析技术	将微电极列阵整合在细胞培养板孔底部，构建实时、动态、定量跟踪细胞形态和增殖分化改变的细胞阻抗检测传感系统。当微电极表面的细胞引起贴壁电极界面阻抗的改变时，这种改变与细胞的实时功能状态改变呈相关性

 

三 Exalpha Biologicals品牌BrdU检测试剂盒

因组织细胞内无内源性BrdU存在，可利用BrdU相关抗体来检测和定位掺入活跃增殖细胞新合成DNA的BrdU，Exalpha Biologicals 品牌BrdU检测试剂盒的优势在于使用细胞层作为固相，将BrdU试剂掺入微孔板中的细胞，除了对细胞增殖情况进行评估外，还可以从单个培养物中分析细胞数量、形态和细胞抗原等信息。同时Exalpha Biologicals 品牌BrdU检测试剂盒可通过试剂盒自带的固定/变性溶液一步完成细胞固定、透化和DNA变性等实验流程，大大缩短了实验时间。Exalpha Biologicals 品牌BrdU检测试剂盒中包含检测细胞增殖活性所需的所有组分、操作简便、无放射性、广泛的样本适用性，已得到众多科研工作者的青睐。

 

四 Exalpha Biologicals品牌BrdU检测试剂盒优势

简便：提供预稀释的滴管瓶，现用现配

安全：无放射性成分

完整：包含缓冲液、酶、阳性对照玻片和染色参考玻片

灵活：可用于任何物种组织样本

灵敏：极低的背景干扰

经济：成本低，高通量，多种规格

 

经BrdU处理的小鼠小肠免疫组织化学染色图

 

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参考文献

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