1、Mirus广谱DNA转染试剂TransIT®-LT1、TransIT®-2020和TransIT-X2®三者的区别是什么?

2、TransIT®-LT1转染试剂的主要成分是什么?

3、TransIT®-2020转染试剂的主要成分是什么？

4、TransIT®-2020适用于转染哪些细胞？

5、ransIT-X2® Dynamic Delivery System的主要成分是什么？

6、TransIT-X2® Dynamic Delivery System和PEI（Polyethyeleneimine）是类似的东西吗？

7、TransIT-X2®可用于贴壁和悬浮细胞转染吗？

8、TransIT-X2®可以转染原代细胞吗？

9、TransIT-X2®可以转染神经细胞吗？

10、抗生素会影响转染试剂的作用吗？

11、如何优化转染效率？

12、转染结果不理想时该怎么办？

1、Mirus广谱DNA转染试剂TransIT®-LT1、TransIT®-2020和TransIT-X2®三者的区别是什么?

TransIT®- LT1、TransIT®-2020和TransIT-X2®都是高效的广谱转染试剂，但它们的化学性质不同，三者特点见下表。TransIT-X2是首选用于高效基因表达及敲除的广谱转染试剂。TransIT-X2能高效地转染质粒DNA和siRNA，也可用于二者共转。TransIT®-LT1和TransIT®-2020仅适用于质粒DNA的转染。TransIT®-2020和TransIT-X2®都是无动物源成分配方，因此可满足有条件限制的应用需求，例如药物开发等。对于不同的细胞类型，不同转染试剂表现效果也有所不同，因此对于不同细胞类型的具体应用，可以参考我们的转染试剂推荐方案数据库Reagent Agent。（https://www.mirusbio.com/tech-resources/transfection-database）

*注：目的基因敲除也可以通过转染编码shRNA的质粒DNA来实现，但该方法敲除基因不如siRNA/miRNA高效。

返回>

2、TransIT®-LT1转染试剂的主要成分是什么?

TransIT®-LT1是一种非脂质体的广谱转染试剂，主要配方是由脂质及蛋白/聚胺混合物组成。它是市面上第一款脂类/聚合物复合配方转染试剂，同时具备高转染效率和低细胞毒性特征。

返回>

3、TransIT®-2020转染试剂的主要成分是什么？

TransIT®-2020是一种专利的脂类-聚合物混合配方转染试剂，可与DNA形成多聚物脂复合物。TransIT®-2020配方中不含任何动物源成分。

返回>

4、TransIT®-2020适用于转染哪些细胞？

TransIT®-2020是广谱转染试剂，适用于转染多种类型细胞。

· 细胞系，包括贴壁细胞和悬浮细胞（例如HepG2, MCF-7, Neuro-2a，K562，Jurkat等）点击右侧链接可以查看适用TransIT®-2020转染的细胞系类型View a complete listing of cell lines transfected using TransIT®-2020 (PDF)，

· 原代细胞和干细胞View a complete listing of primary and stem cells transfected using TransIT®-2020 (PDF)。

返回>

5、TransIT-X2® Dynamic Delivery System的主要成分是什么？

TransIT-X2® Dynamic Delivery System是一种先进的非脂质体转染系统，由一种全新型聚合物搭配Mirus专利配方，更容易与核酸形成复合物，适用于质粒DNA与小分子核酸如siRNA、miRNA、pre-miRNA等的高效转染。此外，TransIT-X2®还能实现质粒DNA与siRNA共转染。TransIT-X2®配方中不含任何动物源成分。

返回>

6、TransIT-X2® Dynamic Delivery System和PEI（Polyethyeleneimine）是类似的东西吗？

不是的。TransIT-X2®是一种全新的聚合物配方，并非基于PEI的改良产品。

返回>

7、TransIT-X2®可用于贴壁和悬浮细胞转染吗？

可以。经测试，我们已经用TransIT-X2成功转染过多种贴壁细胞（如CHO-K1，HepG2，原代人乳腺上皮细胞等）和悬浮细胞（如Freestyle 293-F等）。

返回>

8、TransIT-X2®可以转染原代细胞吗？

可以。TransIT-X2®适用于转染多种原代细胞，我们已经测试过HUVECs，原代人乳腺上皮细胞（HMEC）以及正常人皮肤成纤维细胞（NHDF）等原代细胞转染效率都不错。

返回>

9、TransIT-X2®可以转染神经细胞吗？

可以。我们测试过iCell® Neurons, SH-SY5Y, SK-N-MC and PC-12等神经细胞转染效率都很不错。点击右侧链接可以查看适用TransIT-X2®转染的细胞类型以及推荐用量。View a complete listing of cell types transfected using TransIT-X2® by Mirus scientists and corresponding starting reagent-to-nucleic acid ratios. (PDF)

返回>

10、抗生素会影响转染试剂的作用吗？

某些抗生素如卡那霉素是阳离子，会抑制转染试剂/核酸形成复合物，因此我们建议在转染试剂复合物形成这一环节不要使用抗生素。待转染试剂复合物形成后，我们就可以加入到含有低水平抗生素的完全细胞培养基里了（例如将100×青-链霉素双抗稀释到0.1-1×工作浓度的细胞培养基）。

返回>

11、如何优化转染效率？

1）      转染时的细胞密度 (%) ：大多数细胞在转染时细胞密度最好能达到40%-80%，但是不同类型细胞有其最佳的转染密度，在优化转染效率时要先确认细胞的最佳转染密度；

2）      转染试剂与DNA比例：转染试剂与DNA的使用比例通常是1-4ul每1ugDNA，不同细胞可根据实际转染效率进行不同配比的优化；

3）      DNA质粒的质量：转染用的DNA必须是无菌，高浓度，且去除内毒素的质粒。Mirus有一款内毒素去除试剂盒（MiraCLEAN® Endotoxin Removal Kit，货号MIR5900/MIR5910）可以去除质粒中残存的内毒素；

4）      转染试剂与核酸形成复合物要在无血清的培养基中进行：血清可能会干扰转染试剂与核酸形成复合物，因此在配置转染试剂与核酸复合物时需要用无血清、无抗生素的培养基，而将复合物加入细胞的时候，细胞培养基里是可以含血清的。

返回>

12、转染结果不理想时该怎么办？

Mirus每款转染试剂的说明书最后都有TROUBLESHOOTING GUIDE，可以帮助客户对照结果查找问题原因，大部分转染不理想的问题都可以通过优化操作步骤来解决，因此每一个使用Mirus转染试剂的客户，都应在转染前认真阅读产品说明书。

返回>